甲氨蝶呤是一種有機(jī)化合物，為葉酸拮抗劑，在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)過轉(zhuǎn)換后可抑制 DHFR的活性，抑制核酸合成，引起細(xì)胞毒性。

在DHFR穩(wěn)轉(zhuǎn)系統(tǒng)的培養(yǎng)基中加入MTX，隨著MTX濃度的增加，絕大多數(shù)細(xì)胞死亡，但在極少數(shù)幸存下來的抗性細(xì)胞中，DHFR基因得以擴(kuò)增，目的基因拷貝數(shù)隨著增加，提高表達(dá)量，可得到穩(wěn)定的高表達(dá)的細(xì)胞株。